On dispose
- d’une barette de puits contenant un antigène fixé sur le fond,
- d’une solution à tester (contenant ou non des anticorps spécifiques de l’antigène présent dans les puits)
- d’une solution d’anticorps « traceurs », spécifiques des anticorps précédents et associés à une enzyme, l’acétylcholinestérase.
- d’une solution d’Ellman (substrat de l’acétylcholinestérase). Elle se colore sous l’action de l’enzyme.
1. Placer dans chaque puits deux gouttes d’une des solutions à tester.
2. Ajouter dans chacun des puits deux gouttes de la solution d’anticorps traceurs.
3. Laisser incuber 15 min à température ambiante.
4. Procéder au lavage :
– vider le contenu de la barrette en la retournant énergiquement ;
– absorber le liquide restant en tamponnant la barrette avec du papier filtre ;
– rincer à l’aide d’une pissette d’eau distillée ;
– éliminer l’eau de lavage en secouant énergiquement la barrette.
5. Répéter ce lavage deux fois.
6. Ajouter dans chaque puits 4 gouttes (200µL) de la solution d’Ellman.
7. Laisser agir 5 minutes.