C’est l’immunodiffusion sur gel : les solutions déposées dans les puits creusés dans le gel diffusent de façon homogène dans toutes les directions autour du puits. Deux auréoles de diffusion peuvent donc entrer en contact lorsqu’elles ont suffisamment progressé.
- Cette zone de contact reste invisible s’il n’y a pas de réaction entre les deux solutions.
- Quand il y a réaction entre les solutions, il se forme un arc de précipitation visible à l’oeil nu. Celui-ci est dû à l’interaction entre de nombreux anticorps et les antigènes spécifiques, entraînant la formation d’un complexe immun.
Le temps de réaction est de l’ordre de 24h
1- Préparation du gel d’Agar
1.1 Peser dans la coupelle 0,2g d’Agar prélevé à l’aide de la spatule
1.2 Verser 14 mL de tampon puis l’Agar dans le Bécher et dissoudre soigneusement
1.3 Chauffer le mélange en remuant à la spatule jusqu’à ce que le mélange devienne limpide et arrêter au tout début de l’ébullition.
1.4 Retirer à l’aide de la pince en bois et attendre une minute pour manipuler le Bécher sans se brûler
1.5 Pipeter 5 mL de gel d’Agar chaud et fluide et le verser dans une boîte de Pétri
1.6 Egaliser le niveau et supprimer rapidement les bulles
1.7 Ne pas remuer les boîtes avant prise du gel d’Agar : environ 5 mn
2- Préparation du test
2.1 Creuser les puits avec l’emporte-pièce dans le gel d’Agar d’une boîte de Pétri.
2.2 Utiliser le cure-dent pour éliminer les disques de gélose si nécessaire.
3- Réalisation du test
3.1 Repérer sur la boîte de Pétri la disposition des produits à déposer dans les puits .
3.2 Remplir les puits : le produit, prélevé dans un tube avec un compte goutte propre, doit être déposé dans le puits approprié sans débordement ni bulles et sans endommager le gel d’agar.
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